探针法qPCR实验是实时荧光定量PCR的一种，基于其高特异性、高灵敏的实时、定量检测优势，现已在病原体检测、基因表达分析、基因型鉴定、拷贝数变异分析、食安检测、环境检测、法医检测等诸多生物学和医学研究领域得到广泛应用。
基于探针法qPCR技术的检测与诊断试剂产品的开发，综合了上游分子酶原料、样本前处理、检测试剂反应体系优化、实时荧光定量PCR仪研发、注册申报（根据产品项目而有所不同）等多个环节。
在诸多环节中，上游分子酶原料是整个产品开发的起始点，也是关键点。众多从业企业或自己从头开发分子酶，或单独购买酶原料，或直接购买由原料生产厂家优化的qPCR Mix，或将整个试剂工艺整体外包……
市场之大，各自有对应策略，不管何种方法，目标都是提供可以真正解决问题的、具有高性价比的稳定产品线。
qPCR Mix通常包含除模板DNA、引物和探针外的其他反应所需成分，这其中起重要作用的是分子酶原料及buffer体系，如何选择或优化出合适的qPCR Mix是探针法qPCR实验成功的关键。启衡星生物的研发团队基于多年的工作经验，从qPCR Mix筛选与优化时需考虑的因素及筛选步骤等不同层面进行了总结。
| 项目名称 | 项目内容 |
| 实验目的 | 确定实验所需检测的目标基因类型,如基因表达分析、病原体检测、实验目的基因突变分析等。选择与目标序列兼容的qPCR Mix。 |
| 扩增效率要求 | 尽量选择高效的qPCR Mix，以提高实验的灵敏度和特异性。 |
| 实验通量 | 根据单重或多重检测需求，选择需要的qPCR Mix。 |
| 稳定性和便捷性 | 选择预混液可以简化实验操作，减少误差，同时预混液的稳定性和稳定性和便捷性保存条件也是需要考虑的因素；选择热稳定性高的qPCR Mix。 |
| 防污染 | 在qPCR Mix中添加防污染的成分(如UNG等)，减少假阳性结果。 |
| 成本效益 | 考虑实验预算，选择性价比高的qPCR Mix。 |
| 品牌和供应商 | 选择信誉好、服务质量高的品牌和供应商；考虑供应商的技术支持和产品售后服务。 |
| 用户评价 | 参考其他研究人员的使用体验和评价。 |
探针法qPCR Mix筛选与优化需考虑的因素
探针法qPCR Mix筛选步骤
| 应用场景 | 产品推荐 |
| SNP基因分型检测 | 首推FS-Q2001，其次FS-Q6001。 |
| 病原菌、病毒、核酸残留、低拷贝基因检测等 |
|
| 甲基化检测 | 推荐FS-Q6001。 |
| 粗体样本（含抑制剂样本的检测） | 推荐FS-Q6001。 |
| 熔解曲线法（探针法qPCR Mix） | 推荐FS-Q6001。 |
| 以上1-5种的任意一种应用场景 | 考虑探针法qPCR反应体系的多样性，亦可同时测试FS-Q2001、FS-Q3001、FS-Q3010、FS-Q6001四款产品，并挑选出最合适的一款。 |
| 无法满足客户的需求 | 公司现有的四款产品均CDMO定制服务 |
探针法qPCR Mix选择指南
探针法qPCR Mix产品列表
