启衡星血液直接qPCR试剂盒专为血液样本设计,无需繁琐的核酸提取步骤,仅需简单裂解即可进行qPCR扩增。适用于新鲜血、4℃储存血、-20℃冻存血及EDTA抗凝血等多种样本类型,兼容Taqman探针法与SNP检测,操作简便,结果准确,1小时内即可完成从血液到基因分型/定量分析的全流程。
随着分子诊断技术的快速发展,基于临床检测和科研应用对快速、高效、低成本的要求,无需核酸提取的血液直接扩增(血液直扩)技术逐渐成为一种重要的发展趋势。然而,在现有的血液直扩产品中,普遍存在裂解效率不足导致扩增灵敏度降低、样本适用范围狭窄(无法涵盖新鲜血、冷藏血和冻存血等多种样本)、对引物/探针体系兼容性差等核心问题。这些问题的关键点在于如何在简化操作流程的同时,确保检测结果的可靠性和一致性。
启衡星生物基于自身在核酸扩增技术和试剂开发方面的优势,开发了StarLighter血液直扩探针法qPCR试剂盒。该试剂盒通过优化裂解体系和扩增条件,实现了对多种类型血液样本的高效处理(可兼容EDTA抗凝血、冻存血等复杂样本模型,同时对GC含量差异大、Tm值跨度宽的引物/探针均展现出优异适配性),无需复杂的核酸提取步骤,即可直接进行qPCR检测。其检测结果在荧光信号强度和Ct值上与传统核酸提取方法相当,同时显著提高了操作的便捷性和检测速度,为血液直扩技术提供了兼具精准性与高效性的创新解决方案。
产品简介
本试剂盒可适用于各种类型的血液样本,无需繁琐的核酸提取纯化,仅须血液样本简单裂解取上清即可进行qPCR扩增,操作简便,可降低污染风险,且检测结果与核酸提取后的纯DNA产物作为模板的结果一致。
产品优势
1、操作简便:95℃加热5min后离心即可,无需复杂的血液核酸提取步骤;
2、裂解释放效率高:释放剂裂解效果与血液提取核酸基因组效果一致;
3、样本兼容性广泛:适用于新鲜血、4℃储存血、-20℃冻存血、EDTA抗凝血等样本;
4、引物/探针兼容性广泛:对不同GC%/Tm值的引物/探针均可实现理想扩增。
产品应用
1、Taqman 探针法SNP检测;
2、qPCR探针法定量检测。
产品性能
从血液到基因分型/定量分析仅需1h左右即可完成。
Fig.1 试剂盒操作流程图
- SNP分型准确,兼容新鲜血、4℃储存血、-20℃冻存血等样本
将已知SNP基因分型(杂合型A位点:FAM+/Vic-,杂合型B位点:FAM+/Vic-,杂合型C位点:FAM+/Vic-)的新鲜血液样本A用本试剂盒进行基因分型检测,检测结果准确(Fig.2)。
Fig.2 新鲜血样本A裂解释放后对不同SNP位点的检测结果。血液裂解离心取上清,20 μL反应体系,加4 μL 上清做为模板进行qPCR,检测结果与Sanger测序结果一致。
将已知SNP基因分型(杂合型A位点:FAM+/Vic-,杂合型B位点:FAM+/Vic-,杂合型C位点:FAM+/Vic-)的冷藏血液样本A(4℃储存2个月)用本试剂盒进行基因分型检测,检测结果准确(Fig.3)。
Fig.3 储存血样本A裂解释放后对不同SNP位点的检测结果。血液裂解离心取上清,20 μL反应体系,加4 μL 上清做为模板进行qPCR,检测结果与Sanger测序结果一致。
- 核酸释放检测结果荧光信号强度及Ct值媲美经核酸提取获得高纯DNA的扩增结果
各取A样本200 μL EDTA血液,分别用本试剂盒中的核酸释放剂以及全血基因组DNA提取试剂盒(FS-B8001)进行处理,在得到相同上清/洗脱体积情况下,各取4 μL上清为模板,分别对B位点进行检测。结果显示并本试剂盒对全血简单处理后的扩增结果与全血核酸提取纯化检测的结果Ct值一致,荧光强度不变(Fig.4)。
Fig.4 启衡星血液直扩试剂盒与血液核酸提取试剂盒对比。粗线为核酸释放液处理的qPCR结果,细线为全血基因组DNA提取纯化后的qPCR结果。蓝色为FAM通道,橘色为Rox通道(内参),绿色为Vic通道。
产品详情咨询/产品试用申请:010-62149251/15801217100(微信同号)